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模型建立

动物品系：新西兰兔
。

造模方法：生理盐水冲洗结膜囊
，将8 mm直径滤纸片直接浸泡于1 mol/L NaOH溶液中15 s
，置于兔左眼眼角膜正中50 s后取下，迅速用约20 ml生理盐水冲洗角膜及结膜囊，即刻氧氟沙星滴眼液滴眼

，连续滴眼3次
。

检测指标：裂隙灯检查
，角膜新生血管面积 。

碱烧伤致新西兰兔眼角膜新生血管的影响

角膜本身无血管，毛细血管网围绕角膜缘，如果血管超越角膜缘进入透明区即为病理性
。新生血管结构和功能不完善

，容易发生血浆渗漏，造成角膜水肿、脂质沉着以及激发的角膜瘢痕化，严重影响视力，也使角膜移植排斥反应的发生率大大增加。

角膜新生血管面积（mm2）

*同一时间点各组与模型对照组比较有统计学差异（P< 0.05）

角膜新生血管长度（mm）

*同一时间点各组与模型对照组比较有统计学差异（P< 0.05）

角膜区域VEGF表达强度和累计面积评分

角膜FITC-Lectin4免疫组化是如何做的，其中角膜FITC-Lectin4是什么？

••。 

•具体操作步骤如下
：

1.取出角膜标本

，用生理盐水冲洗，切成适当大小。

2.用甲醛固定角膜标本15分钟
，然后用PBS洗涤3次
。 

3.用0.5%的Triton X-100处理角膜标本10分钟
，以增加细胞膜的通透性。

4.用PBS洗涤3次，然后在PBS中加入10%的正常羊血清封闭非特异性结合位点30分钟。 

5.用PBS洗涤3次
，然后加入FITC-Lectin4（稀释比例为1:100）孵育1小时
。 

6.用PBS洗涤3次，然后在暗处观察和拍摄荧光图像。 •